Presença de sequências de DNA do poliomavírus JC em criptas aberrantes de mucosa colo-rectal humana

Abstract

O carcinoma colo-rectal é uma das principais causas de morte em Portugal e no mundo. Vários estudos têm sugerido existir uma associação entre o surgimento da doença carcinogénica colo-rectal e a infecção pelo poliomavírus humano JC. Deste modo, o despoletar desta doença poderá surgir a partir da infecção não lítica das células epiteliais da mucosa. Segundo trabalhos realizados na área da biologia molecular presume-se que existam etapas percussoras do carcinoma colo-rectal, nomeadamente a sequência Foco de Criptas Aberrantes/Pólipo/Carcinoma colo-rectal. Neste projecto foi estimado o “risco” da presença do poliomavírus JC estar significativamente associado ao foco de criptas aberrantes, avaliando assim se o vírus estimula a formação da cripta aberrante. A presença da sequência de DNA do poliomavírus humano JC foi detectada através de electroforese horizontal em gel de agarose, após ter sido amplificado o DNA de amostras de parede intestinal através do método de Nested-PCR. Foi analisada a presença do poliomavírus JC em: 15 amostras de mucosas colorectais (grupo-controlo), 15 amostras colhidas em focos de criptas aberrantes (grupo de estudo) e 9 amostras de mucosa normal não-adjacente ao foco de criptas aberrantes recolhidas em pacientes onde foi colhida amostra de foco de criptas aberrantes (grupo de estudo). Não foi detectada a sequência genética do poliomavírus JC em qualquer cripta aberrante, mucosa não-adjacente a estas lesões ou mucosa do grupo-controlo. Com os resultados obtidos verificou-se que não existe tropismo do vírus JC pela cripta aberrante, ao contrário do que acontece pelo pólipo.

The colorectal carcinoma is one of the leading causes of death in Portugal and the World. Several studies have suggested there is a relationship of association between the emergence of the colorectal carcinogenic disease and the infection by the human polyomavirus JC. Thus, the trigger of this disease may arise from the non-lytic infection of epithelial cells of the mucosa. According to studies conducted in the field of molecular biology it is assumed that there is a sequence of steps that leads to colorectal cancer, namely Aberrant Crypt Foci / Polyp / Colorectal Carcinoma. In this project was analized the "risk" of the association being highly associated to the presence of polyomavírus JC in aberrant crypt foci, evaluating so if this virus stimulates the aberrant crypt foci formation. The presence and absence of the DNA sequence of human polyomavirus JC was detected by an horizontal electrophoresis in agarose gel after being amplified DNA from intestinal samples by Nested- PCR method. Was analyzed the presence of JC virus in: 15 samples of normal colorectal mucosa, belonging to the control group, 15 samples taken from aberrant crypt foci, belonging to the study group and 9 samples of normal mucosa collected from the same patients were was taken the sample of aberrant crypt focus (sample of normal mucosa adjacent to non-aberrant crypt foci), belonging to the study group. It wasn’t detected the genetic sequence of poliomavírus JC in any aberrant crypt, non-adjacent mucosa to this lesions or mucosa from control group. With the obtained results was verified that there is no tropism from JC virus for the aberrant crypt foci as it is for the polyp.