Contributo para o estudo da estabilidade de drogas de abuso em amostras biológicas analisadas por cromatografia de gases acoplada à espectrometria de massas

Abstract

O consumo de drogas de abuso tem vindo a aumentar ao longo dos anos, sendo assim um grave problema de saúde pública e estabilidade social. Face a este problema, o presente estudo tem como objetivo a deteção e confirmação das drogas de abuso, anfetamina, metanfetamina, morfina e benzoilecgonina (metabolito da cocaína), em amostras de fluido oral e soro provenientes de kits da OraSure Technologies, Inc. Estas amostras apresentavam, prazos de validade situados entre os anos, de 2021 e 2024 e foram armazenadas, à temperatura de 2-8ºC. Foi objetivo de estudo avaliar a estabilidade destas amostras, no que diz respeito a estas drogas de abuso.As substâncias foram extraídas através da técnica de precipitação proteica com acetonitrilo gelado e quimicamente derivatizadas por aquecimento induzido por microondas durante 90s (soluções de MBTFA para a anfetamina e metanfetamina e de MSTFA com 5% de TMCS para a morfina e benzoilecgonina). A identificação das substâncias foi realizada com um cromatógrafo de gases 7890B equipado com uma coluna cromatográfica HP-5MS (5% de fenilmetilpolisiloxano, 30m x 0,32mm; 0,25µm d.i.) e acoplado a um espetrómetro de massa de quadrupolo simples com uma fonte de impacto eletrónico de alta eficiência 5977A (GC-MS-EI, Agilent Technologies). Inicialmente, os cromatogramas foram adquiridos em modo full SCAN e após a análise dos padrões de fragmentação de cada substância foi usado o modo SIM (selected ion monitoring).Foi possível confirmar a presença de anfetamina, metanfetamina, benzoilecgonina e morfina, de acordo com os critérios de aceitação da World Anti-Doping Agency (WADA) nas amostras de fluido oral e soro. Nas amostras de fluido oral, os resultados obtidos indicam que não há degradação de qualquer das drogas investigadas durante o período de armazenamento estudado. Os resultados do estudo preliminar realizado em soro apontam para o mesmo tipo de comportamento para a anfetamina, metanfetamina e morfina.

The consumption of drugs of abuse has increased over the years, thus being a serious public health and social stability problem. Faced with this problem, the present study aims to detect and confirm the drugs of abuse, amphetamine, methamphetamine, morphine and benzoylecgonine, a cocaine metabolite, in oral fluid and serum samples from OraSure Technologies, Inc kits, with different expiration dates, between 2021 and 2024 All samples were stored under the same conditions, 2-8°C. The objective of this study was to evaluate the stability of these samples concerning these drugs of abuse.The substances were extracted through the protein precipitation technique with iced acetonitrile and chemically derivatized by microwave-induced heating for 90s (MBTFA solutions for amphetamine and methamphetamine and MSTFA with 5% TMCS for morphine and benzoylecgonine). The identification of the substances was carried out with a 7890B gas chromatograph equipped with an HP-5MS chromatographic column (5% phenylmethylpolysiloxane, 30m x 0.32mm; 0.25µm i.d.) and coupled to a simple quadrupole mass spectrometer with a high-efficiency electronic impact source 5977A (GC-MS-EI, Agilent Technologies). Initially, the chromatograms were acquired in full SCAN mode, and after the analysis of the mass spectrums and fragmentation patterns of each substance, the SIM, selected ion monitoring, mode was used.It was possible to confirm the presence of amphetamine, methamphetamine, benzoylecgonine and morphine, according to the acceptance criteria of the World Anti-Doping Agency (WADA) in the samples of oral fluid and serum. In the oral fluid samples, the results obtained indicate that there is no degradation of any of the drugs investigated associated with storage time.