Impacto dos polimorfismos de citocinas no desenvolvimento do Adenocarcinoma Colo-Retal

Abstract

O carcinoma colo-retal (CCR) constitui atualmente uma das principais doenças responsáveis por elevadas taxas de mortalidade e morbilidade em todo o mundo. Embora se trate de uma doença multifatorial, inúmeros estudos têm sugerido uma forte associação entre períodos prolongados de inflamação e o aumento do risco de CCR. Sendo as citocinas o principal agente mediador de respostas imunes no organismo humano, estas podem constituir biomarcadores fundamentais na prevenção, controlo e tratamento desta doença. Nesta perspetiva, este estudo pretendeu averiguar o impacto dos variantes genéticos das citocinas envolvidos no mecanismo de inflamação, IL-1, IL-2, IL-6, IL-12, TNF-α, IFN-γ e TGF-β, no risco de CCR. Para tal, os polimorfismos IL-1α -889 T>C, IL-1β -511 C>T & +3960 C>T, IL-1R Pst1970 C>T, IL-1Ra 11100 T>C, IL-2 -330 T>G & +160 G>T, IL-6 -174 C>G & nt565 G>A, IL-12 +1188 G>C, TNF-α -238 G>A & -308 G>A, IFN-γ +874 T>A, TGB-β cod10 T>C & cod25 G>C foram analisadas por PCR-SSP em 56 biópsias de indivíduos portadores de adenocarcinoma colo-retal esporádico (ACRE) e em 100 amostras provenientes de indivíduos saudáveis. Neste trabalho, os genótipos associados à alta produção/atividade da IL-1: IL1A-889 TC (53 vs 20, p=0,00003); IL1R -1970TT (7% vs 43%, p<0,0001); IL1RA 11100TT (6% vs 29%, p=0,0002) surgiram associados à prevalência de ACRE. Também os genótipos associados à alta expressão das citocinas pró-inflamatórias TNF- e IL2: TNFA -238AA (6% vs 18%, p=0,02); IL2 +160GG (61% vs 32%, p=0,0005) apareceram associados à prevalência desta patologia. Finalmente, os haplótipos de alta produção/atividade das citocinas Th3, IL-6 e TGF-b: IL6 -174/nt565 GG (46% vs 23%, p<0,0001) TGFB cod10/cod25 TG (50% vs 34%, p=0,005) encontraram-se associados à diminuição de risco para ACRE. Estes resultados sugerem a existência de uma associação entre a maioria dos variantes polimorfismos das citocinas e o risco para o ACRE. Deste modo, as mutações dos genes IL1A, IL1R, IL1RA, TNFA e IL2 associadas ao aumento de expressão/atividade das citocinas pró-inflamatória IL-1 TNF- e IL2, parecem aumentar os níveis de inflamação de longo prazo na mucosa cólica e retal e consequentemente despoletar o desenvolvimento tumoral. Contrariamente, os variantes de alta expressão/atividade da IL-6 e TGF-β parecem associar-se à diminuição dos processos inflamatórios/tumorais do colon e reto. Estes resultados parecem suportar a hipótese de que o CCR esta relacionado com o aumento das atividades pró-inflamatórias (Th1) e que a genotipagem destas citocinas tem potencial para ser uma ferramenta útil no estabelecimento do diagnóstico clínico do ACRE.

Colorectal cancer (CRC) is currently one of the main diseases responsible for high rates of mortality and morbidity worldwide. Although it is a multifactorial disease, numerous studies have suggested a strong association between prolonged stages of inflammation and the incresase of CRC risk. Cytokines could constitute key biomarkers in prevention, control and treatment of this disease, once they are the major immune mediator agents of immune responses in the human body. In this perspective, this study sought to investigate the impact of genes involved in inflammation, IL-1, IL-2, IL-6, IL-12, TNF-α, IFN-γ e TGF-β, and CRC risk. For such polymorphisms IL-1α -889 T>C, IL-1β -511 C>T & +3954 C>T, IL-1R Pst1970 C>T, IL-1Ra 11100 T>C, IL-2 -330 T>G & +160 G>T, IL-6 -174 C>G & nt565 G>A, IL-12 +1188 G>C, TNF-α -238 G>A & -308 G>A, IFN-γ +874 T>A, TGB-β cod10 T>C & cod25 G>C were analyzed by PCR-SSP for 56 biopsy with sporadic colorectal adenocarcinoma (SCA) and 100 healthy patients. High production/activity genotypes IL-1α: IL1A-889 TC (53 vs 20, p=0,00003); IL1R -1970TT (7% vs 43%, p<0,0001); IL1RA 11100TT (6% vs 29%, p=0,0002) were associated with SCA prevalence. Also, high expression genotypes of pro-inflammatory cytokines TNF-α and IL2: TNFA -238AA (6% vs 18%, p=0,02); IL2 +160GG (61% vs 32%, p=0,0005) were associated with this pathology. Finally, high production haplotypes in Th3 cytokines, IL-6 e TGF-b: IL6 -174/nt565 GG (46% vs 23%, p<0,0001) TGFB cod10/cod25 TG (50% vs 34%, p=0,005) were associated with SCA prevention. These results suggest the existence of an association between most of the studied polymorphic variants and SCA risk. Mutations in IL1A, IL1R, IL1RA, TNFA and IL2 genes associated with IL-1 TNF- e IL2 expression/activity rising, appear to increase inflammation levels in colon and rectal mucosa, and consequently could trigger tumor development. In contrast, IL-6 and TGF-b high expression/activity variants seem to decrease inflammatory/tumor processes in colon and rectum. This findings seem to support the hypothesis that CRC is related with pro-inflammatory (Th1) activities increasing and that cytokines genotyping have the potential to constitute an important tool in SCA clinical diagnosis establishment.