Please use this identifier to cite or link to this item: https://hdl.handle.net/10316/32957
Title: Amyloid-beta peptide-evoked Src signaling and redox changes in hippocampal cells
Authors: Fão, Lígia Vanessa Rocha 
Orientador: Rego, Ana Cristina Carvalho
Mota, Sandra
Keywords: Engenharia biomédica; Ciências da saúde; Doença de Alzheimer; Mecanismo celular; Fosforilação; Peptídeo beta-amilóide; Peróxido de hidrogénio; Cinase
Issue Date: Sep-2016
Serial title, monograph or event: Amyloid-beta peptide-evoked Src signaling and redox changes in hippocampal cells
Place of publication or event: Coimbra
Abstract: A doença de Alzheimer (DA) é a principal causa de demência nos idosos e caracterizase por défices de memória e declínio cognitivo consequentes da perda sináptica e neuronal que afeta inicialmente o hipocampo. Histologicamente, a DA caracteriza-se pela acumulação extracelular de placas compostas pelo peptídeo beta-amilóide (Aβ) e a acumulação intracelular de tranças neurofibrilares compostas pela proteína tau hiperfosforilada. A forma oligomérica do peptídeo Aβ1-42 é considerada como a mais tóxica a nível sináptico, sendo responsável pelas alterações cognitivas verificadas nas fases iniciais da DA. O peptídeo Aβ induz, entre outros, a formação de espécies reativas de oxigénio (ERO) e a desregulação da homeostasia do Ca2+ i, efeitos comumente associados à disfunção neuronal nos estádios iniciais da DA. Além disso, o peróxido de hidrogénio (H2O2) pode modular a atividade da tirosina cinase Src e do fator de transcrição Nrf2 (do inglês “nuclear factor erythroid derived 2-related”) que regula a resposta antioxidante. Assim, neste trabalho avaliámos o efeito de oligómeros de Aβ1-42 na fosforilação/ativação de Src e Nrf2, através da produção de H2O2, e o retro-controlo da Src na regulação do stresse oxidativo utilizando culturas primárias de neurónios maduros de hipocampo. Estudámos também o papel da Src na dinâmica mitocondrial, assim como a sua relação com a localização subcelular de Nrf2, usando a linha celular de hipocampo HT22. Os nossos resultados demonstraram que, em neurónios hipocampo, a exposição a oligómeros de Aβ1-42 induziu um aumento do Ca2+ i através da ativação dos recetores Nmetil- D-aspartato (NMDA), e aumento da produção de H2O2 pela mitocôndria. Além disso, todos estes efeitos foram modulados após inibição da Src, provavelmente devido ao seu efeito na regulação dos receptores NMDA. É importante salientar que a produção de ERO associada ao Aβ levou, por si só, ao aumento da fosforilação da Src. Além disso, a produção de ERO associada ao Aβ induziu a fosforilação do Nrf2 em neurónios do hipocampo. Adicionalmente, tanto em neurónios primários de hipocampo como na linha HT22, observámos a fosforilação da Src e do Nrf2 após tratamento com H2O2; de forma interessante, a fosforilação do Nrf2 na Ser40 ocorreu de forma dependente da Src. Em extratos nucleares das células HT22 expostas a H2O2 não se verificaram alterações nos níveis totais de Nrf2, contudo observou-se uma diminuição dos níveis nucleares de Src e um aumento da sua fosforilação/ativação, sugerindo um possível papel da Src no núcleo, independente do Nrf2. Em extratos mitocondriais de células HT22, a exposição a H2O2 induziu um aumento dos níveis de fosforilação da Src e do Nrf2. Adicionalmente, a ativação da Src associada ao tratamento com H2O2 parece ter um efeito preventivo na fissão mitocondrial. Estes resultados evidenciam, em neurónios primários maduros de hipocampo, a ativação da Src e do Nrf2 por Aβ de forma dependente dos recetores NMDA e dos ERO, fornecendo assim novas perspetivas sobre a caracterização de mecanismos celulares potencialmente envolvidos na DA. Além disso, nas células HT22, o nosso estudo evidencia a fosforilação da Src e do Nrf2 por H2O2 na mitocôndria, assim como a fosforilação da Src no núcleo, sugerindo a ocorrência de mecanismos subcelulares que poderão estar envolvidos na regulação de alterações redox. Palavras-Chave: Doença de Alzheimer, peptídeo beta-amilóide, peróxido de hidrogénio, Src cinase, fator de transcrição Nrf2.
Description: Dissertação de Mestrado Integrado em Engenharia Biomédica apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.
URI: https://hdl.handle.net/10316/32957
Rights: openAccess
Appears in Collections:UC - Dissertações de Mestrado
FCTUC Física - Teses de Mestrado

Files in This Item:
File Description SizeFormat
Dissertação_Mest_Ligia_Fao_VF.pdf4 MBAdobe PDFView/Open
Show full item record

Page view(s) 20

665
checked on Mar 26, 2024

Download(s) 50

625
checked on Mar 26, 2024

Google ScholarTM

Check


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.