HEMATO-ONCOLOGIA: CONTRIBUTO DA CITOGENÉTICA CONVENCIONAL E MOLECULAR NO CENTRO HOSPITALAR DE TRÁS OS MONTES E ALTO DOURO (CHTMAD)

Abstract

A Citogenética estuda a morfologia, estrutura, função e comportamento biológico dos cromossomas e divide-se em duas áreas: citogenética convencional e citogenética molecular. A evolução das técnicas citogenéticas permitiu, nas neoplasias hematológicas, a identificação e deteção de alterações cromossómicas com implicações no diagnóstico, orientação clínica, decisão terapêutica e avaliação do prognóstico. A citogenética convencional tem como objetivo o estudo de cromossomas e da sua morfologia pela análise do cariótipo, enquanto a citogenética molecular, pela técnica de Hibridação in situ fluorescente (FISH), permite a deteção de anomalias cromossómicas, a análise em núcleos interfásicos e em cortes de tecido. As neoplasias hematológicas influenciam a normal produção, desenvolvimento e diferenciação de células sanguíneas. A abordagem diagnóstica em hemato-oncologia deve ser feita de acordo com a classificação dos tumores dos tecidos hematopoiético e linfóide da Organização Mundial de Saúde, baseada nos dados morfológicos, imunofenotípicos, genéticos e clínicos. Este relatório de estágio aborda seis neoplasias hematológicas: três de linhagem mielóide – Leucemia Mielóide Crónica (10 amostras), Síndrome Mielodisplásico (10 amostras) e Leucemia Mielóide Aguda (7 amostras); três de linhagem linfóide – Leucemia Linfática Crónica (10 amostras), Mieloma Múltiplo (10 amostras) e Linfoma Folicular (6 amostras). Estas neoplasias hematológicas perfazem um total de 53 amostras anonimizadas e excedentárias, 33 de medula óssea e 20 de sangue periférico, pertencentes a indivíduos do Centro Hospitalar de Trás os Montes e Alto Douro. Na totalidade das amostras, foi realizada a técnica de FISH, sendo que, em 35 destas, foi efetuada, cumulativamente, a análise por citogenética convencional, a bandagem GTL. Este estágio permitiu-me a obtenção de experiência em diagnóstico genético clínico laboratorial, nomeadamente diagnóstico citogenético hemato-oncológico pela aplicação e realização autónoma de técnicas de citogenética convencional e molecular, como a realização de culturas celulares, manipulação, espalhamento, bandagem, identificação, organização e análise de cariótipos e a sua respetiva classificação citogenética pela realização da técnica de FISH e análise. Do mesmo modo, permitiu-me a integração na rotina do Laboratório de Genética do CHTMAD e a realização de técnicas em amostras para diagnóstico pré-natal, pós-natal e oncológico e o acompanhamento no projeto de implementação da metodologia de Sequenciação de Nova Geração (NGS) em Oncologia.

Cytogenetics is the study of the morphology, structure, function and biological behavior of chromosomes and is divided into two areas: conventional cytogenetics and molecular cytogenetics. The evolution of cytogenetic techniques has allowed, in hematological malignancies, the identification and detection of chromosomal alterations with implications for diagnosis, clinical guidance, therapeutic decision and the evaluation of prognosis. Conventional cytogenetics aims the study of chromosomes and their morphology by karyotype analysis, while molecular cytogenetics, using the Fluorescent In Situ Hybridization (FISH) technique, allows the detection of chromosomal abnormalities, analysis in interphase nuclei and in sections of tissues. Hematologic neoplasms influence the normal production, development and differentiation of blood cells. The diagnostic approach in hemato-oncology should be performed according to the classification of tumors of hematopoietic and lymphoid tissues of the World Health Organization, based on morphological, immunophenotypic, genetic and clinical data. This internship report addresses six hematological neoplasms: three of myeloid lineage – Chronic Myeloid Leukemia (10 samples), Myelodysplastic Syndrome (10 samples) and Acute Myeloid Leukemia (7 samples); three of lymphoid lineage – Chronic Lymphatic Leukemia (10 samples), Multiple Myeloma (10 samples) and Follicular Lymphoma (6 samples). These hematological neoplasms make up a total of 53 samples, anonymized and excess samples, 33 of bone marrow and 20 of peripheral blood, belonging to individuals from the Centro Hospitalar of Trás os Montes and Alto Douro. The FISH technique was performed in all samples and in 35 of these, the analysis by conventional cytogenetics, the GTL banding, was cumulatively performed. This internship allowed me to obtain experience in laboratory clinical genetic diagnosis, namely hemato-oncological cytogenetic diagnosis through the application and autonomous realization of conventional and molecular cytogenetic techniques such as cell cultures, manipulation, spreading, banding, identification, organization and analysis of karyotypes and their respective cytogenetic classification and by performing the FISH technique and analysis. Likewise, it allowed me to integrate into the routine of the Genetics Laboratory of CHTMAD and to perform techniques on samples for prenatal, postnatal and oncological diagnosis and follow-up in the implementation project of the Next Generation Sequencing methodology (NGS) in Oncology.