Efeito do Adper™ Scotchbond™ 1 XT, Clearfil™ SE Bond 2 e Scotchbond™ Universal na atividade de células tipo odontoblasto

Abstract

Introdução: Com vista à simplificação dos procedimentos operatórios, as formulações adesivas têm-se tornado cada vez mais complexas e, dado o maior rigor inerente à investigação e ao fabrico destes materiais, têm sido identificados e estudados diversos compostos indutores de reações biológicas adversas. Objetivo: Com este estudo pretendeu-se avaliar a citotoxicidade de sistemas adesivos representativos das três estratégias adesivas comercialmente disponíveis - condicionar e lavar, autocondicionante e universal. Materiais e Métodos: Obtiveram-se extratos dos adesivos Adper™ Scotchbond™ 1 XT, Clearfil™ SE Bond 2 e Scotchbond™ Universal em meio de cultura DMEM, com os quais se incubaram células odontoblásticas da linha MDPC-23. Avaliou-se a atividade metabólica através do ensaio do MTT, a viabilidade celular pelo ensaio da SRB, as vias de morte e o ciclo celular por citometria de fluxo, a morfologia celular através da coloração das células com o meio May-Grunwald Giemsa e a reatividade dos extratos. Resultados: Os extratos de Adper™ Scotchbond™ 1 XT, Clearfil™ SE Bond 2 e Scotchbond™ Universal determinaram a redução significativa do metabolismo e da viabilidade celular. Após incubação das culturas com os extratos, todos os adesivos determinaram a redução do número de células vivas, com aumento do número de células em apoptose, apoptose tardia/necrose e necrose, assim como uma diminuição do número de células em fase S e em G2/M e um aumento do número de células em fase Pré-G0 e em G0/G1. Estas alterações ocorreram em função do adesivo, da concentração e do tempo de incubação. Os extratos de Clearfil™ SE Bond 2 foram classificados com um maior grau de reatividade, determinando uma maior inibição do crescimento celular, com destruição das camadas celulares. Discussão: Os extratos de Clearfil™ SE Bond 2 determinaram uma redução mais acentuada do metabolismo e da viabilidade celulares e revelaram-se mais reativos, nas diferentes concentrações estudadas. Os extratos condicionaram a viabilidade e propagação das culturas celulares, podendo, clinicamente, interferir com importantes processos fisiológicos de reparação. Clinicamente, o condicionamento da dentina com ácido ortofosfórico favorece a progressão do adesivo nos túbulos dentinários. A incorporação da smear layer pelos adesivos autocondicionantes e universais (aplicados sobre dentina não condicionada) constitui uma barreira adicional à infiltração do adesivo, reduzindo a proximidade com a polpa dentária e, assim, a citotoxicidade. Conclusões: A citotoxicidade dos adesivos revelou ser diretamente proporcional à concentração dos extratos e ao tempo de incubação. Os extratos de Clearfil™ SE Bond 2 determinaram uma maior citotoxicidade, nas condições estudadas.

Introduction: To simplify the clinical procedures, dental adhesives are becoming more complex and, given the ascending needed accuracy, several compounds that induce biological adverse reactions have been identified and studied. Objective: In vitro cytotoxicity assessment of adhesive systems of the three commercially available adhesive strategies - total-etch, self-etch and universal. Materials and Methods: Adper™ Scotchbond™ 1 XT, Clearfil™ SE Bond 2 and Scotchbond™ Universal extracts were acquired in cell culture medium DMEM and incubated with the odontoblastic cells MDPC-23. Metabolic activity was assessed through the MTT assay, cellular viability with the SRB assay, cell’s death pathways and cell’s cellular cycle by flow cytometry, cell morphology and the reactivity classification of extracts through the May-Grunwald Giemsa staining. Results: The Adper™ Scotchbond™ 1 XT, Clearfil™ SE Bond 2 and Scotchbond™ Universal extracts determined a significant reduction in metabolism and cell viability. After incubation of the cultures with the extracts, the adhesives determined a reduction in the number of viable cells and an increase in the number of apoptotic, late apoptosis/necrosis and necrotic cells, as well as a decrease in the number of cells in S and G2/M phases and an increase in the number of cells in Pre-G0 and G0/G1 phases. These changes were dependent on the adhesive, the concentration and the time of incubation. Clearfil™ SE Bond 2 extracts were classified as having a higher degree of reactivity, leading to greater inhibition of cell growth, with destruction of the cell’s layers. Discussion: Clearfil™ SE Bond 2 extracts determined the most significant reduction in cell metabolism and viability and proved to be more reactive at the different concentrations. The extracts reduced the viability and proliferation of the cells and, clinically, this may interfere with normal physiological processes of reparative dentinogenesis. Clinically, the acid-etched dentin with phosphoric acid may favor the diffusion of the adhesives through the dentinal tubules. On the other hand, the incorporation of the smear layer by the self-etch and universal adhesives (applied over non-etched dentin) stands as an additional barrier towards adhesive diffusion, reducing pulp proximity and thus, cytotoxicity. Conclusions: The cytotoxicity of the adhesives proved to be directly proportional to the concentration of the extracts and to the incubation time. Clearfil™ SE Bond 2 extracts were the most cytotoxic.