Utilize este identificador para referenciar este registo:
https://hdl.handle.net/10316/28864
Título: | Acção intracelular da terapia fotodinâmica | Autor: | Cândido, Mafalda Sofia Laranjo | Orientador: | Botelho, Maria Filomena Rabaça Roque Gonçalves, António Manuel D'Albuquerque Rocha |
Data: | 2010 | Local de edição ou do evento: | Coimbra | Resumo: | A terapia fotodinâmica constitui uma modalidade terapêutica que pode induzir
morte celular por stresse oxidativo através da activação de um fotossensibilizador pela
luz. Os sensibilizadores do tipo porfirínico têm provado ter boas características e,
investigações recentes indicam que a substituição com grupos hidroxilo e o efeito do
átomo pesado podem contribuir para potenciar a acção fotodinâmica.
Este trabalho permitiu comparar a acção fotodinâmica dos sensibilizadores
5,10,15,20-tetrakis(2-bromo-3-hidroxifenil)porfirina e a 5,15-bis(2-bromo-3
hidroxifenil)porfirina em adenocarcinoma colo-rectal humano in vitro e in vivo. Os
estudos de microscopia de fluorescência apontaram para a localização subcelular
mitocondrial dos sensibilizadores, no entanto, a captação celular de TBr4HPP é
dezassete vezes superior à de BBr2HPP. Apesar desta diferença, os estudos de
proliferação celular mostraram que BBr2HPP tem um efeito fotodinâmico superior
(IC50 às 24 horas: 180nm) à de TBr4HPP (IC50 às 24 horas: 464nm) e que, para ambos
os sensibilizadores, a irradiação é essencial para a citotoxicidade. Nas células de
adenocarcinoma colo-rectal WiDr, estes sensibilizadores induziram morte por necrose,
o que poderá depender não só das características do tratamento fotodinâmico mas
também do perfil molecular das próprias células.
Os estudos in vivo mostraram que ambos os sensibilizadores têm efeito numa
dosagem baixa de 2mg/kg, induzindo diminuição significativa dos crescimento de
xenotransplantes das células WiDr implantadas em ratinhos Balb/c nu/nu. Os resultados
são concordantes com os estudos in vitro que apontam para o maior efeito fotodinâmico
de BBr2HPP. Para este sensibilizador, com um intervalo entre a injecção e a irradiação
de 72 horas, foi possível observar efeitos significativos no volume dos xenotransplantes,
em 83,3% dos casos, logo ao segundo dia de monitorização.
4
Após o follow-up necessário à realização dos estudos in vivo, foi possível excisar os
xenotransplantes e proceder à análise histológica e por citometria de fluxo. Verificou-se
que, após o tratamento fotodinâmico, ainda foi possível encontrar células tumorais
viáveis após o tratamento, apesar das extensas áreas de necrose. Este resultado indica
que, em estudos futuros, será necessário optimizar o protocolo de tratamento, em termos
de concentração do sensibilizador e de energia total e potência da luz a aplicar. Photodynamic therapy is a therapeutic modality cabaple of inducing cell death by oxidative stress through activation of a sensitizer by light. Porphyrins proved to be photosensitizers with appropriate characteristics, and recent investigations showed that substitution with hydroxyl groups and the heavy atom effect may contribute to enhance the photodynamic activity. This work compared the photodynamic activity of 5,10,15,20-tetrakis(2-bromo-3 hydroxyphenyl)porphyrin and 5,15-bis(2-bromo-3-hydroxyphenyl)porphyrin as sensitizers against human colorectal adenocarcinoma in vitro and in vivo. Fluorescence microscopy studies indicated that the subcellular localization of both sensitizers may be the mitochondria, and cellular uptake studies showed that TBr4HPP internalization is seventeen times higher than BBr2HPP. Despite this difference, the cell proliferation studies shown the higher photodynamic effect of BBr2HPP (IC50 at 24 hours: 180nm) in comparison to TBr4HPP (IC50 at 24 hours: 464nm), and that irradiation is essential for cytotoxicity. Both sensitizers induced death by necrosis in the WiDr colorectal adenocarcinoma cells, which may depend not only of the photodynamic treatment but also of the molecular profile of these cells. In vivo studies showed that both sensitizers have effect in a low dose of 2mg/kg inducing a significant decrease in the growth of xenografts of WiDr cells implanted in Balb/c nu/nu mice. Results are consistent with in vitro studies pointing to the greater photodynamic effect of BBr2HPP. For this sensitizer, with an interval between injection and irradiation of 72 hours, we observed significant decrease in the growth of xenografts in 83.3% of cases, immediately in the second day of follow-up. After the follow-up necessary to complete the in vivo studies, it was possible to excise the xenografts and proceed to histological and flow cytometry analysis. After the photodynamic treatment, it was still possible to find viable tumor cells, despite the 8 extensive areas of necrosis. This result indicates that, in the future studies, will be necessary to optimize the treatment protocol, in terms of concentration of the sensitizer and total energy and power of light to be applied. |
Descrição: | Dissertação de mestrado em Biologia Celular e Molecular apresentada ao Departamento de Ciências da Vida da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra | URI: | https://hdl.handle.net/10316/28864 | Direitos: | openAccess |
Aparece nas coleções: | UC - Dissertações de Mestrado FCTUC Ciências da Vida - Teses de Mestrado |
Ficheiros deste registo:
Ficheiro | Descrição | Tamanho | Formato | |
---|---|---|---|---|
01. Capa e lombada.pptx | 634.41 kB | Microsoft Powerpoint | Ver/Abrir | |
03. Citação.pdf | 22.31 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
04. Agradecimentos.pdf | 30.27 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
05. Indice.pdf | 21.93 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
06. Resumo.pdf | 18.9 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
07. Abstract.pdf | 18.51 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
08. Lista de Abreviaturas.pdf | 29.75 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
09. Introdução.pdf | 485.92 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
10. Objectivos.pdf | 19.45 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
11. Material e Métodos.pdf | 281.42 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
12. Resultados.pdf | 3.04 MB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
13. Discussão.pdf | 102.14 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
14. Conclusões.pdf | 23.07 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
15. Bibliografia.pdf | 93.1 kB | Adobe PDF | Ver/Abrir | |
02. Folha de Rosto.pptx | 238.07 kB | Unknown | Ver/Abrir |
Visualizações de página
517
Visto em 24/set/2024
Downloads 5
6.438
Visto em 24/set/2024
Google ScholarTM
Verificar
Todos os registos no repositório estão protegidos por leis de copyright, com todos os direitos reservados.