Hidroximetil-pirrolo-tiazóis no cancro da mama e a importância da inibição das PARP of PARP inhibition" Orientation:

Abstract

A quimioterapia é uma importante componente do tratamento do cancro da mama. As mostardas nitrogenadas, que têm o DNA como alvo farmacológico, são agentes antineoplásicos particularmente eficazes, e entre eles incluem-se os compostos 6,7-bis(hidroximetil)-1H,3H-pirrolo[1,2-c]tiazóis. Os objectivos do trabalho passam pela avaliação da citotoxicidade de novos compostos 6,7-bis(hidroximetil)-1H,3H-pirrolo[1,2-c]tiazóis quirais, nomeadamente o ASRO-13, ASRO-15, ASRO-17, MIS1707, MIS1786 e MIS1787, nas linhas celulares de adenocarcinoma da mama positivas para RE, MCF7, positivas para HER2/neu, HCC1954, e tripla negativa, HCC1806. Também se avaliou o efeito dos compostos ASRO-13 e ASRO-17 na viabilidade e tipos de morte celular, ciclo celular e expressão das proteínas Bax e Bcl-2 por citometria de fluxo, na produção total de proteína pelo ensaio do SRB, na alteração do perfil proteico através de géis 2-D e os efeitos no DNA celular, avaliado pelo ensaio do cometa. Todos os compostos inibem a proliferação celular e, os compostos MSI1786 e MSI1787 são particularmente promissores. Verificou-se que as modificações na estrutura dos compostos influenciam a actividade anti-proliferativa o que se torna importante para a consideração de futuras modificações estruturais. Em relação ao ASRO-13 e ASRO-17, os compostos induzem morte celular principalmente por apoptose tardia e por necrose e interferem preferencialmente com a fase S do ciclo celular. Verificou-se que a produção total de proteínas é afectada e o ensaio clonogénico indica que a duas linhas celulares são sensíveis aos compostos sendo a linha tripla negativa, HCC1806, particularmente sensível. Apesar de não se ter verificado, pelo ensaio cometa, a existência de danos ao nível do DNA com nenhum dos compostos testados, verificou-se que o tratamento com o ASRO-13 influencia o proteoma da linha celular MCF7 com repercussões quer em termos de aumento como de diminuição da expressão de proteínas. Assim, conclui-se que esta família de compostos é promissora no tratamento do cancro da mama, particularmente o triplo negativo, e que, apesar do seu mecanismo de actuação não estar ainda esclarecido, interessa continuar os estudos pré-clínicos.

Chemotherapy has an important role in the management of breast cancer. Nitrogen mustards, which have DNA as farmacological target, are particularly effective against cancer cells and among this class of compounds are chiral 6,7-bis(hydroxymethyl)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]thiazoles. The objectives for this work are to evaluate cytotoxicity of new chiral 6,7-bis(hydroxymethyl)-1H,3H-pyrrolo[1,2-c]thiazoles, namely ASRO-13, ASRO-15, ASRO-17, MIS1707, MIS1786 and MIS1787, in breast cancer cell line positive for estrogen receptor, MCF7, positive for HER2/neu, HCC1954 and triple negative, HCC1806. It was also evaluated the effect of ASRO-13 and ASRO-17 in cell viability and types of cell death, cell cycle and the expression of Bax and Bcl-2 proteins by flow cytometry, in the total protein production by SBR assay, in the alterations of the protein profile thought 2-D gel and in the nuclear DNA by the comet assay. All compounds inhibited cell proliferation and compounds MIS1786 and MIS1787 are particularly promising. We verified that some of the changes in the structure of the compounds influencing the anti-proliferative activity, which is important for future consideration on the structural modifications. Compounds ASRO-13 and ASRO-17 induced cell death mainly by late apoptosis and necrosis and interfered with S phase of cell cycle. We verified that total protein production is affected and clonogenic assay indicates that both cell lines are sensitive to the compounds, in which triple negative cell line, HCC1806, is particularly sensitive. Although it was not verified the DNA damage by comet assay with any of the compounds, it was possible to verify that ASRO-13 alters the proteome of MCF7 cell line, in which some proteins are underexpressed and others are overexpressed. Therefore, it is possible to conclude that this family of compounds is very promising in the therapeutic of breast cancer, particularly in the triple negative and, despite their unclear mechanism of action, it is interesting to continue with pre-clinic studies.